01文章背景概述BACKGROUNDINTRODUCTION由于霉菌毒素污染的普遍性和严重后果,研发没便宜仪器和专门技术人员的廉价检测平台来展开高通量霉菌毒素分析,具备十分最重要的意义。由于酶联成免疫吸附法(ELISA)具备非常简单、成本低、效率高等优点,且可以肉眼仔细观察朗读信号,是一种很有前途的方法。但传统ELISA灵敏度较低,并不限于于在资源有限的区域展开肉眼现场检测。金纳米粒子(AuNPs)具备低消光系数、独有的局域表面等离子体共振(LSPR)特性,产生的比色信号比传统的ELISA方法灵敏得多。
单体诱导的AuNPsLSPR变化总是造成显著的颜色对比变化,其范围可从红色到蓝色,不易被肉眼辨识。此外,核对传统ELISA,等离子体酶联成免疫吸附试验(pELISA)具备高通量、高灵敏度等优点,早已引发了人们的普遍注目。但是在pELISA平台的研发中,利用酶催化剂来启动时AuNP单体依然是一个挑战。目前仅有碱性磷酸酶、乙酰胆碱酯酶、葡萄糖氧化酶等几种酶在免疫检测平台中被顺利用作引起AuNP挤满。
其中过氧化氢(H2O2)是多种酶催化剂的标准化底物或产物,因此H2O2诱导的AuNP单体具备多用途。2018年8月,南昌大学XiruiChen等人在《Talanta》(IF=4.916,化学2区)上公开发表了为题“Acolorimetricimmunoassaybasedonglucoseoxidase-inducedAuNPaggregationforthedetectionoffumonisinB1”的论文。明确提出了一种新的pELISA来检测伏马菌素B1(FB1)的方法,通过融合酪胺的h2o2细胞内的苯酚单体以及AuNP与酪胺之间的强劲静电相互作用,可以诱导AuNP的挤满,从而可以展开肉眼仔细观察。
02所用到的主要方法METHODS(1)紫外-可见分光光度法(2)入射电子显微镜(3)等离子体酶联成免疫吸附试验(4)高效液相色谱-荧光检测03文章主要内容摘要ABSTRACT在资源受限地区展开高通量检验检测和现场临床时,肉眼比色法检测具备辽阔的应用于前景。本文研发了一种新的必要竞争的等离子体酶联成免疫吸附法(dc-pELISA)用作检测伏伏菌素B1(FB1),该方法基于金纳米颗粒(AuNP)单体,具备高灵敏度和强劲的肉眼朗读信号。通过辣根过氧化物酶(HRP)/过氧化氢(H2O2)/酪胺(TYR)体系诱导AuNP单体,造成了从红色到蓝色的显著变化。
在该体系中,通过葡萄糖氧化酶(GOX)细胞内的葡萄糖水解反应产生H2O2,用于FB1-GOX作为竞争性抗原。
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